當水體污染比較嚴重的時，水樣檢測結果超出檢測上限時，就需要對水樣進行稀釋。程控定量封口機采用酶底物法檢測方法來檢測較臟的地下水或者排污口的水樣也需要稀釋到100倍甚至1000倍。那么在檢測時需要注意些什么呢？

1、實驗步驟越少，結果偏差也會越小。所以酶底物法步驟少，會更有優勢。

2、在做稀釋時，應保證取樣量大。譬如10倍稀釋：取10ml原液+90ml無菌水配成100ml10倍稀釋液①；若是要百倍千倍稀釋，則需要進行梯度稀釋，由①中的10倍稀釋樣再取10ml，再加90ml無菌水，此時完成了100倍的稀釋。若是千倍稀釋，則需要從100倍稀釋樣中再取10ml進行稀釋。

3、每次再去原液時，取樣的均勻程度直接影響了后面的稀釋結果，故我們在每次取樣前必須充分搖勻。

4、為了使數據更加地穩定及接近真實值，建議每個梯度稀釋做平行樣。這時，我們可以設計成取20ml原液加180ml無菌水配成200ml樣或者取30ml加270ml無菌水配成300ml10倍稀釋樣，以此往下做梯度稀釋。若是未知樣且濃度可能會很高的時候，我們建議這樣去稀釋，因為這樣我們便可以保證每個梯度至少有一個樣。若已經大概了解水樣來源及濃度，可直接梯度稀釋到我們要的濃度，并做2-3個平行樣。

5、對于未知樣需要進行濃度的摸索，無論是多管還是酶底物法，都會有較大工作量。前期的梯度稀釋及每個梯度做平行樣都是無法避免的，當我們后期對水樣濃度有了把握后便可以直接稀釋到某個濃度，這樣就減少許多的工作量了。由于酶底物法是已滅菌可直接用的選擇性培養基，比起多管法會更加簡便、不用洗大量的管子。另外濾膜法在做臟水時就完全不適合了。

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